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磷酸钙-DNA共沉淀法
核酸以磷酸钙-DNA共沉淀物的形式出现时,可使DNA附在细胞表面,利于细胞吞入摄取,或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内,进入细胞的DNA仅有1%~5%可以进入细胞核中,其中仅有不到1%的DNA可以与细胞DNA整合,在细胞中进行稳定表达,基因转导的频率大约为10-4,这项技术能用于任何DNA导入哺乳类动物进行暂时性表达或长期转化的研究。此方法对于贴壁细胞转染是最常用并首选的方法。
1、配液
(1)2×HBS 1.63g NaCl
1.19g Hepes
0.023g Na2PO4、2H2O
加水至100ml pH7.1过滤,4℃保存
(2)2mmo...
DEAE-葡聚糖转染法, 基因, 基因转染, 实验设计, 磷酸钙-DNA共沉淀法, 脂质体介导DNA转染法, 转染阅读全文
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2012年03月01日
⁄ 细胞研究
⁄ 被围观 271+
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GE技术手册发布计划:
第一期:
Ion Exchange Chromatography & Chromatofocusing Principles and Methods
离子交换色谱及色谱聚焦原理和方法
第二期:
Hydrophobic Interaction and...
Applications, GE, Isolation, Methodology, mononuclear cells, 分离, 单核细胞, 技术手册阅读全文
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第一章 细胞培养的基本原理与技术
现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术,而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系,特别是在医药领域的发展,细胞培养更具有特殊的作用和价值。比如基因工程药物或疫苗在研究生产过程中很多是通过细胞培养来实现的。基因工程乙肝疫苗很多是以CHO细胞作为载体;细胞工程中更是离不细胞培养,杂交瘤单克隆抗体,完全是通过细胞培养来实现的,既使是现在飞速发展的基因工程抗体也离不开细胞培养。正在倍受重视的基因治疗、体细胞治疗...
microcarrier, microcarrier culture, 上皮细胞, 内皮细胞, 巨噬细胞, 微载体, 无蛋白培养基, 生物反应器, 神经细胞, 细胞冻存, 细胞分离, 细胞周期, 细胞复苏, 细胞计数, 肌组织, 肿瘤, 肿瘤细胞, 限定化学成分培养基阅读全文
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一、细胞培养基本概念
细胞培养是指从体内组织取出细胞模拟体内环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使其生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物为单个细胞或细胞群。
在医学遗传学研究中应用最广泛的是外周血淋巴细胞、皮肤成纤维细胞和各种能在体外长期生长的细胞系。外周血淋巴细胞培养具有时间短、技术简便、可重复取材等优点,它在临床染色体分析中使用最广泛。体外培养细胞株可在培养过程中发生自发的或在外界作用下的转化,成为永久细胞系,也可直接建成永久细胞系,...
PHA, 外周血, 外周血淋巴细胞, 染色体, 染色体分带技术, 植物凝集素, 植物血凝素, 淋巴细胞, 盖玻片培养法, 组织培养, 细胞培养, 细胞染色体, 绒毛染色体, 羊水, 羊水细胞, 腹水阅读全文











