Roche非放射性原位杂交常见问题解答 Nonradioactive In Situ Hybridization - Frequently Asked Questions 更多内容请点击下载电子版技术手册：Nonradioactive In Situ Hybridization - Frequently Asked Questions

Roche滤膜杂交地高辛应用手册 DIG Application Manual for Filter Hybridization 点击下载技术手册电子版：DIG Application Manual for Filter Hybridization 或者分别点击查看各个章节的内容： Chapter 1 · Introduction 1. Introduction Introduction to the DIG System and Application Manual 8 Chapter 2 · DIG Basics 1. DIG Basics Introduction 16 2. DIG Basics DIG Labeling 17 3. DIG Basics Evaluation of Probe Labeling Efficiency 23 4. DIG Basics Electrophoresis of Target N...

Roche非放射性原位杂交地高辛应用手册第四版 DIG Application Manual for Nonradioactive In Situ Hybridization, 4th edition 点击下载电子版技术手册：DIG Application Manual for Nonradioactive In Situ Hybridization, 4th edition 或者分别点击查看各个章节的内容： Chapter 1 General Introduction toIn Situ Hybridization General Introduction to In Situ Hybridization 8 Introduction to Hapten Labeling and Detection of Nucleic Acids 10 Choosing the Right Labeling Method for your...

Roche公司PCR实验技术应用手册（第三版） PCR Applications Manual - 3rd edition 如需下载电子版的PCR实验技术应用手册（第三版），请点击下载 您也可以点击下边的单独章节，下载各章节的内容： Table of contens (PDF-File - 597 KB) Introduction (PDF-File - 611 KB) General Guidelines (PDF File - 528 KB) Primer design and template preparation  (PDF-File - 1.00 MB) General PCR methods (PDF-File - 1.43 MB) General RT-PCR methods (PDF-File - 1.52 MB) Post-PCR Purification and Cloning (PDF...

RNA干扰(RNA interference，RNAi)是由双链RNA(double strandedRNA， dsRNA)分子在mRNA水平关闭相应序列基因表达或使其沉默的过程。dsRNA可以抑制不同类型细胞的靶向基因表达，用特异性的抗体几乎检测不到靶向基因所表达的蛋白质。因此，RNAi技术又被形象地称为基因敲除(knock out)或基因沉默(gene silencing)。RNAi是一种典型的转录后基因调控方法，又称转录后基因沉默(post tracriptional gene silencing，PTGS)[1]。 1 RNAi技术的发展过程 早在1990年，植物学家Jorgeen等人用矮牵牛花做试验，将紫色素合成基因导...

遗传标记在遗传学的建立和发展过程中有着举足轻重的作用，随着遗传学的进一步发展和分子生物学的异军突起，遗传标记先后相应地经历了形态标记、细胞学标记、生化标记和DNA分子标记四个发展阶段。前三种标记都是以基因表达的结果为基础的，是对基因的间接反映；而DNA分子标记则是DNA水平遗传变异的直接反映，它具有能对各个发育时期的个体、各个组织、器官甚至细胞作出“中性”以及操作简便等特点。正是这些特点，奠定了它极其广泛的应用基础。DNA分子标记本质上是指能反映生物个体或种群间基因组中某种差异的特异特...

在分子生物学研究中，DNA的序列分析是进一步研究和改造目的基因的基础。目前用于测序的技术主要有Sanger等（1977）发明的双脱氧链末端终止法和Maxam和 Gilbert（1977）发明的化学降解法。这二种方法在原理上差异很大，但都是根据核苷酸在某一固定的点开始，随机在某一个特定的碱基处终止，产生A，T，C，G四组不同长度的一系列核苷酸，然后在尿素变性的PAGE胶上电泳进行检测，从而获得DNA序列。目前Sanger测序法得到了广泛的应用。 Sanger 法测序的原理就是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直...

互补的核苷酸序列通过Walson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。 　　杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DNA或总RNA。根据使用的方法被检测的核酸可以是提纯的，也可以在细胞内杂交, 即细胞原位杂交。探针必须经过标记，以便示踪和检测。使用最普遍的探针标记物是同位素, 但由于同位素的安全性，近年来发展了许多非同位素标记探针的方法。 　　核酸...

第一节 概 述 　　PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链反应)是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法.它包括三个基本步骤: (1) 变性(Denature):目的双链DNA片段在94℃下解链; (2) 退火(Anneal):两种寡核苷酸引物在适当温度(50℃左右)下与模板上的目的序列通过氢键配对;(3) 延伸(Extension):在Taq DNA聚合酶合成DNA的最适温度下,以目的DNA为模板进行合成.由这三个基本步骤组成一轮循环,理论上每一轮循环将使目的DNA扩增一倍（图4）,这些经合成产生的DNA又可作为下一轮循环的模板,所以经25-35轮循环就可使DNA扩增达10...

第一节 概 述 　　DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同品种（个体）基因组的限制性内切酶的酶切位点碱基发生突变，或酶切位点之间发生了碱基的插入、缺失，导致酶切片段大小发生了变化，这种变化可以通过特定探针杂交进行检测，从而可比较不同品种（个体）的DNA水平的差异（即多态性），多个探针的比较可以确立生物的进化和分类关系。所...