1.建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅参考文献，或在购买细胞株时咨询。 2.其它实验室惯用的培养基不妨一试，许多培养基可以适合多种细胞。 3.根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640 。 4.用多种培养基培养目的细胞，观察其生长状态，可以用生长曲线、集落形成率等指标判断，根据实验结果选择最佳培养基，这是最客观的方法，但比较繁琐。 表 不同细胞系适用的培养基 细胞系 细胞类型 种 组 织 培养基 293 成纤维细胞 人 胚胎肾 MEM, 10%...

一、培养基的历史 体外培养（in vitro culture）包括：组织培养（tissue culture）、细胞培养（cell culture）、器官培养（organ culture）。顾名思义，就是将活体结构成分（如活体组织、活体细胞或者活体器官等）从体内或其寄生体内取出，放在类似于体内生存环境的体外环境中，让其生长发育的方法。广义组织培养与体外培养同义。 体外培养已经历了约一百年的发展历史，但发展初期进程比较缓慢，没有引起很多学者的重视。直到上世纪50年代后期，体外培养技术才广泛应用于生物学研究的各个领域，使这项技术得到飞...

细胞培养基本条件 1、合适的细胞培养基 合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的最重要的条件之一，培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质，而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境。 2、优质血清 目前，大多数合成培养基都需要添加血清。血清是细胞培养液中最重要的成分之一，含有细胞生长所需的多种生长因子及其它营养成分。 3、无菌无毒细胞培养环境 无菌无毒的操作环境和培养环境是保证细胞在体外培养成功的首要条件。在体外培养的细胞由于缺乏对微生物和有毒物的防御能力，一旦被微生物或有毒...

1.如何选用培养基？ 培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养，各种目的无血清培养的首选是AIM V培养 基（SFM）。 2.为什么要热灭活血清？ 加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。 3.L－谷氨酰胺在细胞培养中重要吗？它在溶液中...

1.细胞培养实验室常见问题1 A. 血清问题 B. 培养基 2.血清的分类 类别 动物年龄 胎牛血清 (FBS) 胎儿 新生牛血清（NCS） 出生10日内 小牛血清BCS 16 – 22 周 供体牛血清 成年牛 3.沉淀 血清问题 •你卖的血清是不是污染了，我看见里面有微生物了！ •我看见血清里有大片沉淀，这个现象正常吗? •我把你的血清培养了，发现有细菌生长，我要退货！ 4.关于沉淀的解答 •说明1: 血清非人工产品，有些东西沉淀出来系自然现象 –纤维蛋白原 –盐析出。如磷酸钙等 –胆固醇和脂肪酸 –蛋白析出 5.关于沉淀的解答 6...

Wave细胞培养手册原理和方法 WAVE Bioreactor Systems – Cell culture procedures WAVE Bioreactor摇袋式细胞培养生物反应器是一种专利产品。其研发始于1996年，并且在1998年投入商品化生产。目前在世界各地有数百台在使用中。WAVE Bioreactor摇袋式细胞培养生物反应器适用于各种类型的细胞培养，包括CHO、NSO、杂交瘤、HEK293、昆虫细胞/baculovirus杆状病毒、腺病毒、T细胞、植物细胞和初级人类细胞株。 在这个装置中，细胞及培养被置于一个预先消过毒的无菌塑料袋中，这种塑料袋也被称之为Cellbags生...

Lecture 5 – Cell Culture Engineering 课程摘要 Professor Saltzman reviews the concept of gene therapy, and gives some examples of where this is applied. Methods to help deliver DNA into cells using viruses and cationic lipids are discussed, as a way to overcome some challenges in gene therapy. Next, Professor Saltzman gives a brief introduction into bacterial and mammalian cell physiology. He describes the different tissues in the body, the cell development/differenti...

ATCC Universal Mycoplasma Detection Kit是基于PCR技术老检测细胞培养过程中可能存的支原体污染的。所有PCR过程中会用到的试剂，该试剂盒均已经提供，并且对PCR的反应也做了优化。特制的预混反应缓冲液，dNTPs，热稳定的聚合酶，再加上针对支原体16S rRNA基因编码区设计的特异性引物都保证了整个检测反应的特异性。而来自组织或其他细菌的DNA则不会被扩增。该试剂盒可以检测60多种支原体，尿原体，螺原体，无胆甾原体等，包括M. arginini, M. fermentans, M. hominis, M.hyorhinis, M. orale, M. pirum, M. sali...

Universal Mycoplasma Detection Kit from American Type Culture Collection (ATCC) 提起ATCC，做细胞培养的人应该没有人不知道吧！ 美国模式培养物集存库(American type culture collection)即ATCC www.atcc.org ATCC成立于1925年，是世界上最大的生物资源中心，由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理，是一家全球性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向全球发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品，推动科学研究的验证、应用及进步。 目前，ATCC可以提供以下类别生物标准品：细胞株（3000多...

Contents Introduction 1 Purpose of the Handbook 1 Introduction to Cell Culture . 2 What is Cell Culture? . 2 Finite vs Continuous Cell Line 2 Culture Conditions 2 Cryopreservation . 2 Morphology of Cells in Culture . 3 Applications of Cell Culture 3 Cell Culture Laboratory 4 Safety . 4 Biosafety Levels 4 SDS 5 Safety Equipment 5 Personal Protective Equipment (PPE) . 5 Safe Laboratory Practices 5 Cell Culture Equipment . 6 Basic Equipment . . . . . . . . . . . . . . . . . ...